G418在体外破坏mRNA的稳定性

mRNA稳定性是蛋白质表达的关键决定因素，对单个mRNA的特异性较低，翻译也会促进mRNA衰变。原核和真核翻译抑制剂都广泛稳定mRNA，破坏tRNA生物发生的突变同样稳定酵母中的mRNA。这些发现表明翻译是mRNA稳定性的关键决定因素。

科学家们提出核糖体错误是否会影响哺乳动物系统中的mRNA稳定性。在实验中，科学家们测试了Geneticin-G418，这是一种氨基糖苷类抗生素 ,在分子遗传试验中，它通过抑制转座子Tn601，Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成，对原核和真核等细胞产生毒素，是稳定转染最常用的抗性筛选试剂看其是否影响mRNA稳定性，美迪西生物医药可对此类药物进行药效评价。

在实验过程中，科学家们首先滴定了兔网织红细胞裂解物中的翻译抑制剂，并量化了报告基因mRNA，确定了所有三种翻译抑制剂的浓度，其中荧光素酶产生一致，但适度降低。使用这些中间抑制剂浓度，在翻译反应期间定量了萤火虫荧光素酶mRNA水平。

上图为实验数据，在中间抗生素浓度（5.0ng / μL G418和嘌呤霉素，2.5ng / μL环己酰亚胺）下，G418相对于对照反应和与其他翻译伸长抑制剂的反应不稳定。30分钟后，与对照反应相比，含有G418的体外翻译反应具有显着较少的mRNA，并且与没有抑制剂的对照反应相比，环己酰亚胺和嘌呤霉素都相对稳定，含有G418的翻译反应结束时存在的mRNA明显较少。总而言之，这些数据表明G418会破坏mRNA的稳定性。

参考文献：

[1]R S Gupta, D Schlessinger. Coupling of rates of transcription, translation, and messenger ribonucleic acid degradation in streptomycin-dependent mutants of Escherichia coli. J Bacteriol. 1976 Jan;125(1):84-93. doi: 10.1128/jb.125.1.84-93.1976.

[2]Yavuz T. Durmaz, et al. Geneticin reduces mRNA stability. PLoS One. 2022; 17(7): e0272058. Published online 2022 Jul 28. doi: 10.1371/journal.pone.0272058